高速公路上大巴车，在凌晨两点之五点禁止在高速路通行。

高速公路属于高等级公路。中国交通部《公路工程技术标准》规定，高速公路指：能适应年平均昼夜小客车交通量为25000辆以上、专供汽车分道高速行驶、并全部控制出入的公路。

大巴车夜间行驶规定如下：

1、必须按规定随车配备两名或以上具备资质的、经考核合格的驾驶员；

2、大巴车驾驶员在夜间2时至5时之间运营时，必须在公司规定的休息点停车换人；

3、在休息点待班的驾驶员要保证有充分休息的时间，并保证在每天夜班接班前有不低于6小时的强制卧床休息时间;每班车执行驾驶员落地换人时；

下车休息的随车驾驶员不得低于1人，另一名未下车的随车驾驶员不得立即驾驶大巴车，必须由新换上车的驾驶员驾驶；

4、大巴车在交接班期间，要提前做好旅客安全告知和其他相关服务工作，确保旅客人身和财产安全；

下车休息的驾驶员必须在交班后1小时内强制卧床休息，与第二次轮换上车的的间隔时间不得低于8小时；

5、夜间22时至次日凌晨6时之间，驾驶员连续驾驶时间不得超过2小时，每次停车休息时间不得少于25分钟；夜间行车速度必须保证在日间限速的80%以内；高速公路最高速度不得超过80公里/小时。